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總蛋白提取試劑盒(2D電泳用)

簡要描述:貝博® BBproExtra® 總蛋白提取試劑盒(2D電泳用)提供全套試劑,適用于從各種原代或傳代細(xì)胞和各種實(shí)體組織,如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等動物組織中提取總蛋白。配合其他試劑時(shí),也可以用于植物、細(xì)菌、真菌、酵母等樣品的總蛋白提取。本試劑盒含有的配方能夠有效溶解細(xì)胞膜組份,包括細(xì)胞質(zhì)膜、核膜和各種細(xì)胞器膜。

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2025-10-12
  • 訪  問  量:284

詳細(xì)介紹

貝博® BBproExtra® 總蛋白提取試劑盒(2D電泳用)提供全套試劑,適用于從各種原代或傳代細(xì)胞和各種實(shí)體組織,如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等動物組織中提取總蛋白。配合其他試劑時(shí),也可以用于植物、細(xì)菌、真菌、酵母等樣品的總蛋白提取。本試劑盒含有的配方能夠有效溶解細(xì)胞膜組份,包括細(xì)胞質(zhì)膜、核膜和各種細(xì)胞器膜。

總蛋白提取試劑盒(2D電泳用)含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了保證。

保存溫度                        

2-8℃
注意事項(xiàng)
1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完!
有效期                        
一年
檢測方法                        
WB,IP等
適用樣本                        
動物細(xì)胞/組織
產(chǎn)品特點(diǎn)                        
1.使用方便。
2.含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
3.紫外檢測蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
4.蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性。
產(chǎn)品應(yīng)用
WB,IP等
儀器準(zhǔn)備                        
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
試劑準(zhǔn)備                        
1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備                        
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項(xiàng):
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過程須保持樣品處于低溫。
蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。
如果試劑盒不能短時(shí)間內(nèi)用完,蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
使用方法
細(xì)胞總蛋白提取:
1.提取液制備:
每500ul的總蛋白提取液中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物和2ul磷酸酶抑制劑混合物,混勻后備用。
2.取5-10×106個(gè)細(xì)胞,在4℃,1000×g條件下離心5-10分鐘,小心吸取培養(yǎng)基,盡可能吸干,收集細(xì)胞。
3.用冷PBS洗滌細(xì)胞兩次,每次洗滌后盡可能吸干上清。
4.每5×106個(gè)細(xì)胞中加入500ul的總蛋白提取液,混勻后,室溫振蕩20-30分鐘。
5.在14000×g條件下離心10分鐘。
6.將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管,即可得到總蛋白。
7.將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。

組織總蛋白提取:
1.提取液準(zhǔn)備:
每500ul冷的總蛋白提取液中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物和2ul磷酸酶抑制劑混合物,混勻后置冰上備用。
2.取50-100mg組織樣本,用PBS洗干凈,然后用刀盡可能剪碎,加入500ul總蛋白提取液,用組織勻漿器/勻漿機(jī)勻漿至無明顯肉眼可見固體。
3.將組織勻漿吸入一預(yù)冷的干凈離心管中,在4℃條件下振蕩10-20分鐘。
4.在4℃,10000-14000×g條件下離心15分鐘。
5.將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管,即得到總蛋白。
6.將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。

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