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藻類蛋白提取試劑盒

簡(jiǎn)要描述:產(chǎn)品概述 product description 貝博® BBproExtra® 藻類蛋白提取試劑盒可以從各種藻類中提取總蛋白,包括各種藻類植物以及藍(lán)藻門的原核藻類和原生生物藻類。也可用于純化蛋白的粗品制備。提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便。 本試劑盒含有的配方能夠有效溶解細(xì)胞膜組份,包括細(xì)胞質(zhì)膜、核膜和各種細(xì)胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了保證。 本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫沉淀、ELISA、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、酶活性測(cè)定等下游蛋白研究實(shí)驗(yàn)。 本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構(gòu)象的活性蛋白。 本試劑盒中不含有EDTA,與金屬螯和層析等下游應(yīng)用兼容。

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2025-10-12
  • 訪  問(wèn)  量:264

詳細(xì)介紹

保存溫度
2-8℃
注意事項(xiàng)
1.蛋白酶抑制劑未開(kāi)蓋使用前也可以2-8℃儲(chǔ)存。開(kāi)蓋使用后-20℃儲(chǔ)存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
3.試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完!
有效期
一年
檢測(cè)方法
WB,IP等
適用樣本
藻類
產(chǎn)品特點(diǎn)
1.使用方便,從藻類中提取蛋白不需經(jīng)過(guò)研磨、超聲破碎等前處理。
2.將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
3.含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
4.紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
5.蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性。
產(chǎn)品應(yīng)用
WB,IP等
儀器準(zhǔn)備
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
試劑準(zhǔn)備
1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項(xiàng)
使用注意事項(xiàng):
? 旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
? 蛋白酶抑制劑在2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
? 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。
? 蛋白酶抑制劑儲(chǔ)存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。
? 如果試劑盒不能短時(shí)間內(nèi)用完,蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
? 下游實(shí)驗(yàn)如果是進(jìn)行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性檢測(cè),提取液可以不加蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑,注意提取過(guò)程保持低溫操作,縮短離心時(shí)間。
使用方法
1. 提取液制備:
每500 μl冷的蛋白提取液中加入2 μl蛋白酶抑制劑混合物,混勻后置冰上備用。
2. 用PBS洗滌藻類樣本一次。離心吸干PBS。
3. 按每100mg濕重藻類樣本加入500 μl提取液A,混勻,用勻漿機(jī)/勻漿器充分勻漿。
4. 在4℃條件下振蕩30-60分鐘。
5. 在4℃,12000×g條件下離心15分鐘。
6. 將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管,即可得到藻類總蛋白。
7. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。

常見(jiàn)問(wèn)題分析
1.蛋白濃度低?
處理部分組織樣本時(shí)可能沒(méi)有裂解,導(dǎo)致蛋白濃度低。只要適當(dāng)延長(zhǎng)試劑A的處理時(shí)間即可。在持續(xù)振蕩的條件下處理,沒(méi)有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。

2.用什么方法定量蛋白?
建議用BCA法。不適合用Bradford法,因?yàn)樵噭〢中含有干擾Bradford法的組份,導(dǎo)致定量不準(zhǔn)。如果已經(jīng)進(jìn)行過(guò)透析處理或者用脫鹽柱改換過(guò)緩沖體系,則可以用Bradford法定量。

3.提取的蛋白具有活性嗎?
本試劑盒不含有離子型去垢劑組份,不破壞蛋白的結(jié)構(gòu),沒(méi)有對(duì)蛋白質(zhì)之間原有的相互作用的破壞,蛋白均保持其天然構(gòu)象和活性。
參考文獻(xiàn)
1.Qiuwen Chen, et al.
Physiological effects of nitrate, ammonium, and urea on the growth and microcystins contamination of Microcystis aeruginosa: Implication for nitrogen mitigation
Water Research 2019 (IF=7.913)

2.XiangLiu et al.
Carbon dioxide fixation coupled with ammonium uptake by immobilized Scenedesmus obliquus and its potential for protein production
Bioresource Technology 2019 (IF=6.669)

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